氨基酸对人体的用处（精选10篇）

氨基酸：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。

蛋白质：是由氨基酸以酰胺键形成的复杂高分子化合物，是生物体的基本组成物质。 实验目的：

（1）了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。

（2）掌握蛋白质和某些氨基酸的显色反应原理。

（3）学习几种常用鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

（一）茚三酮反应

（1）实验原理

-氨基酸或含有游离氨基的蛋白质的水解产物与茚三酮水溶液共热，能生成蓝紫色化合物。这是-氨基酸特有的反应，因此常用于-氨基酸的定性或定量测定。

(2)操作方法

取3支试管，编号后分别加入4滴0.5%的甘氨酸、酪蛋白和蛋白质 溶液，再加入2滴0.1%的茚三酮-乙醇溶液，混合均匀后，将试管放在沸水浴中加热1～2min，观察并

比较3支试管显色的先后次序。

样品：甘氨酸、酪蛋白和蛋白质

解释：

（二）双缩脲反应

（1）实验原理：尿素加热至180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性 环境中能与cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。

由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，因此也能发生此反应生成蓝色、紫色或红色的铜盐配合物。氨基酸因不含肽键，故除组氨酸外都不发生此反应。

nh2

—

co

—nh—co—nh2

(双缩脲）

(2)操作方法：取1支试管，加入10滴蛋白质溶液和15-20滴10%naoh溶液，混合均 匀后，再加入3-5滴5%硫酸铜溶液，边加边摇，观察有何现象。

现象：变成蓝色溶液

解释：尿素加热至180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与 cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。

由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，因此也能发生此反应生成蓝色、 紫色或红色的铜盐配合物。

（三）黄色反应

（1）实验原理：几乎所有的蛋白质与浓硝酸作用产生黄色，黄色物质在碱性溶液中进一步形成橙红色。这是因为多数蛋白质分子都含有带苯环的氨基酸，产生黄色的硝化物。

（2）操作方法：

（a) 取一支试管，加4滴蛋白质溶液和2滴浓硝酸（由于强酸作用，蛋白质出现白色沉淀），然后置于水浴中加热，沉淀变成黄色，冷却后，逐滴加入10%naoh溶液至溶液呈 碱性，观察颜色的变化。

（b)取一支试管，加4滴0.1%苯酚溶液代替蛋白质，重复上述操作，观察颜色的变化。 （c)取一支试管，加入少量指甲，再加入5-10滴浓硝酸，放置10min后，观察指甲的 颜色变化。

（四）醋酸铅反应

操作方法

取一支试管， 加1 ml 0.5%醋酸铅溶液，再逐滴加入1%naoh溶液，直到生成的沉淀溶解为止，摇动均匀。再加入5-10滴蛋白质溶液，混合均匀，在水浴上小心加热，待溶液变成棕黑色时，将试管取出冷却，再小心加入2 ml浓盐酸。观察有何现象产生，并

嗅其味，判断是什么物质。

现象：产生大量白色，具有刺激性气味的气体 。该气体是硫化氢气体

解释：蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白质在强碱条件下，可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成黑色的硫化铅沉淀。若加入浓盐酸，就生成有臭味的硫化氢气体。r-sh+2naoh → r-oh+nas+ho 22

na2s+pb+2 →

甲方：____________ 乙方：____________

联系地址：____________ 联系地址：____________

联系电话：____________ 联系方式：____________

传真号码：____________ 传真号码：____________

银行账号：____________

甲方就______________活动邀请乙方为______________模特表演，双方就服务事项达成如下协议：

一、活动内容：

1、 活动主题：____________

2、 活动城市：____________

3、 活动举办时间：____________

4、 活动每天时间：____________

二、双方责任：

一)甲方责任：

1、 负责提供演出场地、舞台、灯光音响。

2、 负责演出期间的彩排、支付演出期内的餐费。(标准15元/餐，或者是提供相关餐饮) 3、 负责安排往返交通费用

4、 安排乙方酒店住宿(三星标间)

5、 甲方具有乙方在车展期间肖像权的使用权。

二)乙方责任：

1、 乙方保证准时参加彩排活动：每天活动时间(待定)到甲方指定地方进行化妆及到现场进行演出。

2、 乙方全力配合甲方演出前的彩排保证正式演出顺利完成。

3、 乙方在活动举办期间内不允许串展及在演出时间内不得有迟到或不到场的现象发生，若______________有此情况发生而造成的损失由乙方承担。(具体场次和表演时间由甲方当天确定后通知乙方)

4、 乙方配合甲方后台的管理工作。

5、 乙方必须服从甲方工作期间的安排及管理

6、 乙方在活动期间不能留任何联系方式给甲方以外的所有人员。

7、 乙方需维护甲方公司的品牌形象。

三、费用：

1、 模特费用：____________

2、 交通费：____________

3、 服装费：____________

4、 甲方支付乙方演出合同总费用共：

付款方式：____________

付款时间：____________

四、违约：____________

甲乙双方没有完成合同规定范围内的义务将视为违约。甲方须按合同规定时间付余款，每延迟一天，应向乙方支付合同总金额1%的违约金。

乙方在彩排期间内缺席的，将取消该模特人员资格，并用备选模特人员顶替，如因乙方责任导致演出不能顺利完成，模特人员不服从甲方工作安排或迟到，不到场等将视为违约，由此所产生的损失由乙方全部承担，甲方有权扣除相应的演出费用。

五、不可预见处理方法：____________ 如演出期间发生自然灾害等不可抗力时甲乙双方协商将损失降到最低

六、如因本合同发生争议，双方友好协商解决;协商不成由南京地区法院管辖。 本合同一式两份，甲乙双方各执一份，具有同等法律效力; 本合同经甲乙双方签字盖章之日起生效。 甲方(盖章) 乙方(盖章)

代表签字：____________ 代表签字：____________

签订日期：____________ 签订日期：____________

前言

纸层析法 纸层析法又称纸色谱法，是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。它是一种以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分，流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相，如缓冲液，甲酰胺等。将试样点在纸条的一端，然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。当组分移动一定距离后，各组分移动距离不同，最后形成互相分离的斑点。将纸取出，待溶剂挥发后，用显色剂或其他适宜方法确定斑点位置。根据组分移动距离（Rf值）与已知样比较，进行定性。用斑点扫描仪或将组分点取下，以溶剂溶出组分，用适宜方法定量（如光度法、比色法等）。

纸层析法（paper chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定；也是定性或定量测定多肽、核酸碱基、糖、有机酸、维生素、抗菌素等物质的一种分离分析工具。纸层析法是用滤

纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的有机溶溶剂是流动相。

在环境分析测试中，有时用纸层析法分离试样组分，它用于一些精度不高的分析，如3，4-苯并芘。但不如GC、HPLC应用普遍。在

做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎，浸出绿色液体，将液体与层析液（石油醚）混合，将滤纸一段进入混合液体，四种色素在层析液中的溶解度不同，在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种色素的相对含量和种类。

纸层析法一般用于叶绿体中色素的分离，叶绿体中色素主要包括胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，它们在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液在滤纸上扩散地快，反之则慢；含量较多者色素带也较宽。最后在滤纸上留下4条色素带，所以利用纸层析法 能清楚地将叶绿体中的色素分离。

氨基酸 氨基酸是构成蛋白质的基本单位，广泛用于食品、医药、添加剂及化妆品行业。随着生物工程技术产业的发展逐渐成为2l世纪全球的主要产业之一，氨基酸的需求量越来越大，品种变更越来越快，工艺改革越来越新。目前全世界氨基酸每年的产量为100万吨，而需求总量是800万吨。我国自20世纪60年代起，氨基酸的应用在食品工业占61％，在饮料工业占30％，医药、日用化工、农业、冶金、环保、轻工、生物工程技术等方面占用的比例逐年增加。

氨基酸在人类生活的很多方面都有着应用：

(1)在食品行业的应用

(2)在医药工业的应用

(3)在饲料添加剂行业的应用

(4)在化妆品行业的应用

(5)在农业上的应用

(6)在其他行业的应用

氨基酸工业还有着广阔的发展前景：

(1)传统的氨基酸生产方法

(2)运用基因工程手段生产氨基酸

(3)大力发展药用中间体,具体为：

①氨基酸及其衍生物逐渐成为药用中间体

②非天然氨基酸是合成活性药物的重要原料

③生产高附加值的非天然氨基酸

一、实验目的

(1)掌握分配层析的原理，学习氨基酸纸层析法的操作技术（包括点样、平衡、展层、显色）。

(2)学习未知样品的氨基酸成分（水解、层析及鉴定）分析的方法。

二、实验原理

(1)纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流过固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。

(2)溶质在滤纸上的移动速度用比移值Rf值表示。

(3)Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。

(4)在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。材料与方法

三、实验装置与试剂

(1)氨基酸标准液(1mg/ml)

亮氨酸、甘氨酸和脯氨酸标准液。

(2)80%甲醇

(3)0.1%茚三酮丙酮溶液

(4)氨基酸混合液(每种氨基酸500mg/mL)

(5)正丁醇

实验仪器

(1)新华滤纸×1

(2)培养皿×1

(3)电热鼓风干燥箱×1

(4)吹风机×1

(5)毛细管×4

（6）针、线、尺×1

（7）钟罩(高约430mm,直径约290mm，具磨口塞)×1

实验操作

(1)滤纸

选用国产新华 1号滤纸， 6cm×7cm。在距滤纸2cm处划线，用

铅笔在线上标上四个点作为点样位子（留出缝线空间）。

（2）点样

点样要合适，样品点的太浓，斑点易扩散或拉长，以致分离不清。用毛细管吸取氨基酸样品，与滤纸垂直方向轻轻碰触点样处的中心，这时样品就自动流出。点样的扩散直径控制在0.5cm之内，点样过程中必须在第一滴样品干后再点第二滴，为使样品加速干燥，可用吹风机吹干，但要注意温度不可过高，以免氨基酸破坏，影响定量结果。 将点好样品的滤纸两侧比齐，用线缝好，揉成筒状。注意缝线处纸的两边不要接触。避免由于毛细管现象使溶剂沿两边移动特别快而造成溶剂前沿不齐，影响Rf值。

(3)展层

将揉成圆筒状的滤纸放入培养皿内 (注意滤纸不要碰皿壁)，当溶剂展层至距离纸的上沿约1cm时，取出滤纸，立即用铅笔标出溶剂前沿位置。

酸溶剂系统：

正丁醇： 80%甲酸：水=15:3:2(体积比)，茚三酮2ml。温度25℃，时间1h。

注意：使用的溶剂系统需新鲜配制，并要摇匀。

（4）显色

待展层基本结束后, 置65℃鼓风箱中10-20min，鼓风保温，滤纸上即显出紫红色/黄色斑点。

（5）Rf值的计算

人体模特创作活动协议书

甲方：_________ 乙方：_________

身份证号：_________

住址：_________

工作单位：_________

联系电话：_________

经甲乙双方协商达成以下协议：

一、甲方的权利义务：

（1）_________受_________全权委托，作为_________在中国大陆权益的全权代理人。

（2）甲方负责活动期间的日常工作。

（3）本次拍摄活动将特邀人体摄影专家现场进行指导创作。

二、乙方的权利义务：

（1）乙方须遵守拍摄创作活动的时间安排：_________；拍摄地点：_________；时间为（每天早上_________，下午_________）。

（2）乙方在拍摄时对模特不得提出有损国家和个人尊严的不合理要求，不得要求模特作出不健康的形体姿态；不得对模特做有侮辱性的动作，注意文明用语。如有违背，甲方有权拒绝其继续参加拍摄活动。乙方在拍摄过程中不得让模特到有危险的地方或要求模特作出有危及人身安全的动作，模特亦有权拒绝其不合理要求。

（3）乙方对其作品享有发表权（必须为国家正规出版刊物。内部刊物、内部资料不享有此权利）。

（4）个人出版画册（或多人结集出版画册）、挂历、台历、单幅画张等有价出版物，每单幅作品需向甲方交纳_________元模特肖像使用费；如个人组织展览或参加商业展览，每幅须向甲方交纳人民币_________元模特肖像使用费用（参加全国、省、市摄影比赛、沙龙不受此款限制），乙方作品如用于商业性广告每单幅作品须向甲方付_________元人民币。乙方在出版展出使用前，应向_________办理相关手续，否则视为侵权。

（5）乙方不得将本次活动所拍摄作品或现场图片用任何形式上网发布，如需发布需同_________另行签定合同。不得用于其他非法途径，禁止摄像，否则_________将依法追究法律责任。

（6）凡参加拍摄活动的摄影家需向_________交纳至少两幅摄影作品，_________有结集出版的权利，作品刊出后付给作者相应稿酬。

（7）如有纠纷，双方按相关法律程序办理。

甲方（盖章）：___________   乙方（签字）：_________

代表人（签字）：_________

_________年____月____日    _________年____月____日

签订地点：______________   签订地点：______________

ABO血型鉴定与动脉血压测量综合实验

摘要 本实验采用波片法鉴定人体ABO血型和汞式压力表测定人体动脉血压。被测者血液遇抗A血清和抗B血清均不凝集，汞式压力表在压紧被测者上臂后松开第一次听到声音时读数110mmHg，声音消失处读数70mmHg。实验表明，该被测者血型为O型，动脉血压为110/70mmHg。

关键词 ABO血型血压玻片法汞式压力表

前言

人类红细胞上存在两种ABO血型系统的抗原，又称为凝集原（agglutinogen），分别是A抗原和B抗原。根据红细胞膜上含有抗原类型的不同，可将血型分为四型：仅有A抗原者为A型，仅有B抗原者为B型，两种抗原均有者为AB型，两者抗原均无者为O型。血型可作为机体免疫系统鉴别“自我”和“异己”的标志。在临床上，血型鉴定是进行输血和组织、器官移植成败的关键。在人类学、法医学研究上，血型鉴定也具有重要意义。

动脉血压（arterial blood pressure）是指血流对动脉管壁的侧压力。在一个心动周期中，动脉血压随着心室的舒缩而发生规律性的波动。在心缩期内，动脉血压上升达到的最高值称为收缩压（systolic pressure）；在心舒期内，动脉血压下降达到的最低值为舒张压（diastolic pressure）。动脉血压过高或过低都会影响各器官的血液供应和心脏血管的负担，如动脉血压过低，将引起器官组织血液供应减少，尤其是造成脑、心、肾、肝等重要器官的供血不足，将引起器官的功能障碍和衰竭。血压过高，则心脏和血管的负担过重。长期高血压患者往往引起心室代偿性肥大，心功能不全，甚至心力衰竭。所以保持动脉血压处于正常的相对稳定状态是十分重要的[1]。学习如何测量动脉血压，对于掌控被测者动脉血压的变化，从而预防和控制疾病具有积极意义。

1 实验目的及原理

1.1 ABO血型鉴定

血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型，如表1。

表1

1.2 动脉血压测定

学习间接测量法（听诊法）测定人体动脉血压原理，并实际测定人体肱动脉的收缩压和舒张压的正常值。间接法测量动脉血压原理是用血压计的袖带在所测动脉外施加压力，再根据血管音的变化来测定血压。通常血液在血管内流动时听不到声音，但如果在血管外施加压力使血管变窄，则血流通过狭窄处形成涡流可发出声音。当缠于上臂血压计袖带内压力超过收缩压时，完全阻断了肱动脉的血流，此时在肱动脉的远端（袖带下）听不到声音，也触不到肱动脉的脉搏。当徐徐放气减小袖带内压，在其压力减低到低于肱动脉收缩压的瞬间，血液在血压达到收缩压时才能通过被压迫变窄的肱动脉，形成涡流，此时能在肱动脉的远端听到声音和触到脉搏，此时袖带内压力的读数为收缩压。若继续放气，当袖带内的压力越接近于舒张压，通过的血流量也越多，血流持续时间越长，听到的声音也越清晰。当袖带内压力等于或稍低于舒张压的瞬间，血管内血流由断续的流动变为连续流动，此时声音突然由强变弱或消失，脉搏也随之恢复正常，此时袖带内的压力为舒张压（图1）。

2实验器材和药品

1） 仪器 显微镜，离心机。

2） 器械 采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔，血压计，听诊器，桌椅。

3） 药品 标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。

3实验步骤

3.1玻片法ABO血型鉴定

（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。

（2） 细胞悬液制备 从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。

（3） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。

（4） 竹签两头分别混合，搅匀。

（5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。

（6） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。

3.2 动脉血压测定

3.2.1 熟悉血压计的结构

常用血压计有两种类型，常用的是汞柱式血压计（图2），另一种是弹簧式血压计（图4-1-3-3）。前者比较精确，后者方便携带。两种血压计均由检压计、袖带和橡皮气球三部分组成。汞柱式血压计的检压计是一个标有0~40 kPa（0~300 mmHg）（1mmHg=0.133kPa,1kPa=7.5mmHg）刻度的玻璃管，上端与大气相通，下端与水银贮槽相通。袖带是一个外包布套的长方形橡皮囊，借橡皮管分别和检压计的水银槽及橡皮球相通。橡皮球是一个带有螺丝帽的球状橡皮囊，供充气和放气之用。近年来又有一种新型的电子血压计在临床上应用。

图1 间接法测量血压原理示意图 图 2 汞柱式血压计及弹簧式血压计

3.2.2听诊法测量动脉血压

1）受试者脱去右臂衣袖，取坐位，全身放松，右肘关节轻度弯曲，置于实验桌上，使上臂中心部与心脏位置同高。

2） 打开血压计，松开血压计橡皮球的螺丝帽，驱出袖带内残留气体，后将螺丝帽旋紧。

3）将袖带平整、松紧适宜地缠绕右上臂，带下缘至少位于肘关节上2cm处，开启水银槽开关。

4）将听诊器两耳器塞入外耳道，务必使耳器弯曲方向与外耳道一致。

5）在肘窝内侧先用手触及肱动脉搏动所在部位，再将听诊器胸器不留缝隙地轻轻贴在上面。

6）测量收缩压：挤压橡皮球将空气打入袖带内，使血压表上水银柱逐渐上升到听诊器听不到脉搏音为止，再继续打气使水银柱再升2.7~4.0kPa（20~30mmHg）。随即慢慢松开气球螺丝帽，徐徐放气，在观察水银柱缓缓下降的同时仔细听诊，在听到“崩”样第一声清晰而短促脉搏音时，血压表上所示水银柱高度即代表收缩压。

7）测量舒张压：使袖带继续徐徐放气，这时声音先依次增强，后又逐渐减弱，最后完全消失。在声音突然由强变弱（或声音变调）这一瞬间，血压表上所示水银柱高度代表舒张压。也有人把声音突然消失时血压计上所示水银柱高度作为舒张压，若取后者，需另外0.67kpa（5 mmHg）较妥。

8）血压记录常以收缩压/舒张压kPa表示，如收缩压、舒张压分别为14.70kPa（110mmHg）和9.33kPa（70mmHg），记为14.70/9.33kPa（110/70mmHg）

9）列表记录你所测得同学的血压。

4 注意事项

4.1 ABO血型鉴定

1）所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。

2）A及B标准血清绝对不能相混，所用滴管上贴橡皮膏标明A及B、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧。

4.2 动脉血压测定

1）室内务必保持安静，测量血压前需嘱受试者静坐放松，以排除体力活动及精神紧张对血压的影响。

2）袖带宽度应为12cm，袖带缠绕不能太紧或太松。听诊器胸器最好用膜型。安放时既不能压得太重，也不能接触过松，更不能压在袖带底下进行测定。

3）需要连续测定2~3次，取其最低值或平均值。重复测定时，袖带内压力必须降至零后再打气。

4）发现血压超过正常范围时，应将袖带解下，让受试者休息10min后再测。

5）血压计用毕应将袖带内气体驱尽、卷好、放置盒内，以防玻璃管折断；并关闭水银贮槽。 5结果与分析

5.1 ABO血型鉴定

实验结果如图3所示，该被测者血液遇抗A血清和抗B血清均不发生凝集，故该被测者血液中红细胞既无A抗原，有无B抗原，由此判断该被测者血型为O型。

甲方：

乙方：

甲方为广告宣传需要聘请乙方签约艺人从事平面广告拍摄和代理企业宣传，经甲、乙双方友好协商，在平等互利，资源互补，互惠互利的基础上达成如下共识。

第一条 甲、乙双方合作内容：甲方聘请乙方签约艺人 作为甲方广告宣传需要的平面广告模特。乙方承诺该艺人为乙方的签约艺人，并依据签约内容有权代理该艺人签订合同，依法保证甲、乙双方商定的表演和肖像权使用，载有该艺人形象的平面广告载体正常发布和使用;甲方承诺按合同约定支付乙方所得的相关费用和艺人酬金。

第二条 甲方聘用第一条所列艺人主要用于平面广告的肖像使用和代理企业做商业推广。乙方该艺人广告事务包括：

1.平面广告形象拍摄和使用：甲方拍摄照片仅限于双方认定的拍摄机构的拍摄，拍摄时间为 个工作日。拍摄日暂定为： 年   月 日(从 年 月 日至 年 月 日);

2.艺人拍摄所需要的服装、道具等由 方提供或负责;

3.艺人及经纪人(一名)去拍摄现场交通、饮食相关费用由 方承担;如到外地拍摄，交通工具和住宿另行协商。

4.甲方对该艺人的平面形象主要依法用于：

5.第二条第四款所列形象使用区域：为中华人民共和国境内注册相关媒介载体，(如包含港、澳、台区域或境外载体，须经乙方认可并请另附媒体清单)。甲方承诺该艺人形象的使用期限为：从 年 月 日至 年 月 日止。

第三条 所有照片版权归乙方，但甲方有权在双方约定的期限、地域和载体上使用该艺人肖像权。甲方拍摄艺人照片除选定用作广告使用的形象照片以外，不使用部分由 方留存，另一方因本合同约定的合作需要可随时调用。本合同结束，所有形象照在不设计甲方的前提下可自由使用。

第四条 乙方代理因第一条合作内容收取艺人酬金为人民币 元，酬金形式为现金。甲方支付酬金方式：签订合同之日七日内或约定拍摄之日三日前甲方支付本条所有酬金的70%，即人民币 元;拍摄结束之日甲方支付所有酬金剩余的30%，即人民币 元。

第五条 第四条所说酬金不含税金，税金由甲方承担。艺人个人所得税由乙方代缴。

第六条 甲方委托乙方承担对艺人广告模特形象进行设计、化妆、造型、装饰、拍照、广告宣传等，乙方依据甲方要求进行并以甲方最终认可的造型完成甲方要求的形象照片，并依据广告宣传方案执行，相关费用另议。第六条相关费用可包含在第四条作为酬金统一计算，也可单列计算，支付方式 。

第七条 出现下列情形之一者视为一方违约：

1.艺人不能按照广告设计内容、造型、拍摄需要执行者，但设计内容、造型、拍摄等违反国家法律、法规和政策者除外;

2.艺人不能按照规定时间参与广告拍摄者;

3.甲方不能按约定时间、数额支付乙方酬金者;

4.甲方对艺人形象照片和肖像权的使用超出甲、乙双方约定使用的范围、时间和载体者;

5.其他情形。

第八条 甲、乙双方承诺保护彼此商业秘密，未尽一方许可另一方不得向任何第三方披露、发布、复制和传播，包括但不限于：

1.甲方所有商业计划书，广告宣传方案;

2.甲、乙双方的商业计划、企业和产品，财务、人员、资产和管理情况;

3.艺人个人隐私和个人相关信息;

4.其他双方可能涉及公司名誉、诚信和经济利益的相关文字、图片、视听产品、创意等。

第九条 任何一方违约，受损方有权依法维护自己的合法权益，要求过错方承担违约责任和赔偿责任。

第十条 本合同自双方签字之日起生效，至合同约定甲方艺人形象使用期限截止终止。

第十一条 特别约定：因不可抗力因素使得甲方无法完成合同约定的广告拍摄，乙方应返还甲方已支付的酬金;因甲方单方面原因致使广告拍摄无法进行，乙方已获得酬金作为违约金。

第十二条 未尽事宜双方协商可对本合同进行修改、补充，但对本合同的任何修改、补充均以书面形式明示。

第十三条 本合同一式二份，甲、乙双方各持一份，具有同等法律效力。

甲方(印章)： 乙方(印章)：

代表签字： 代表签字：

签字日期： 年 月 日

签约地点：

甲方：____________________________________________有限责任公司

乙方：____________

甲方为广告宣传需要聘请乙方签约艺人从事平面广告拍摄和代理企业宣传，经甲、乙双方友好协商，在平等互利，资源互补，互惠互利的基础上达成如下共识。

第一条 甲、乙双方合作内容：____________甲方聘请乙方签约艺人 作为甲方广告宣传需要的平面广告模特。乙方承诺该艺人为乙方的签约艺人，并依据签约内容有权代理该艺人签订合同，依法保证甲、乙双方商定的表演和肖像权使用，载有该艺人形象的平面广告载体正常发布和使用;甲方承诺按合同约定支付乙方所得的相关费用和艺人酬金。

第二条 甲方聘用第一条所列艺人主要用于平面广告的肖像使用和代理企业做商业推广。乙方该艺人广告事务包括：

1.平面广告形象拍摄和使用：____________甲方拍摄照片仅限于双方认定的拍摄机构的拍摄，拍摄时间为________个工作日。拍摄日暂定为：____________ 年

________月 ________日(从________年 ________月 ________日至________年 ________月 ________日);

2.艺人拍摄所需要的服装、道具等由 方提供或负责;

3.艺人及经纪人(一名)去拍摄现场交通、饮食相关费用由 方承担;如到外地拍摄，交通工具和住宿另行协商。

4.甲方对该艺人的平面形象主要依法用于：____________

，甲方将上述实际使用的载体清单将交一份给乙方存档备案。

5.第二条第四款所列形象使用区域：____________为中华人民共和国境内注册相关媒介载体，(如包含港、澳、台区域或境外载体，须经乙方认可并请另附媒体清单)。甲方承诺该艺人形象的使用期限为：____________从________年 ________月 ________日至________年 ________月 ________日止。

第三条 所有照片版权归乙方，但甲方有权在双方约定的期限、地域和载体上使用该艺人肖像权。甲方拍摄艺人照片除选定用作广告使用的形象照片以外，不使用部分由 方留存，另一方因本合同约定的合作需要可随时调用。本合同结束，所有形象照在不设计甲方的前提下可自由使用。

第四条 乙方代理因第一条合作内容收取艺人酬金为人民币________________元，酬金形式为现金。甲方支付酬金方式：____________签订合同之日七日内或约定拍摄之日三日前甲方支付本条所有酬金的________%，即人民币 元;拍摄结束之日甲方支付所有酬金剩余的________%，即人民币________________元。

第五条 第四条所说酬金不含税金，税金由甲方承担。艺人个人所得税由乙方代缴。

第六条 甲方委托乙方承担对艺人广告模特形象进行设计、化妆、造型、装饰、拍照、广告宣传等，乙方依据甲方要求进行并以甲方最终认可的造型完成甲方要求的形象照片，并依据广告宣传方案执行，相关费用另议。第六条相关费用可包含在第四条作为酬金统一计算，也可单列计算，支付方式 。

第七条 出现下列情形之一者视为一方违约：____________

1.艺人不能按照广告设计内容、造型、拍摄需要执行者，但设计内容、造型、拍摄等违反国家法律、法规和政策者除外;

2.艺人不能按照规定时间参与广告拍摄者;

3.甲方不能按约定时间、数额支付乙方酬金者;

4.甲方对艺人形象照片和肖像权的使用超出甲、乙双方约定使用的范围、时间和载体者;

5.其他情形。

第八条 甲、乙双方承诺保护彼此商业秘密，未尽一方许可另一方不得向任何第三方披露、发布、复制和传播，包括但不限于：

1.甲方所有商业计划书，广告宣传方案;

2.甲、乙双方的商业计划、企业和产品，财务、人员、资产和管理情况;

3.艺人个人隐私和个人相关信息;

4.其他双方可能涉及公司名誉、诚信和经济利益的相关文字、图片、视听产品、创意等。

第九条 任何一方违约，受损方有权依法维护自己的合法权益，要求过错方承担违约责任和赔偿责任。

第十条 本合同自双方签字之日起生效，至合同约定甲方艺人形象使用期限截止终止。

第十一条 特别约定：____________因不可抗力因素使得甲方无法完成合同约定的广告拍摄，乙方应返还甲方已支付的酬金;因甲方单方面原因致使广告拍摄无法进行，乙方已获得酬金作为违约金。

第十二条 未尽事宜双方协商可对本合同进行修改、补充，但对本合同的任何修改、补充均以书面形式明示。

第十三条 本合同一式二份，甲、乙双方各持一份，具有同等法律效力。

甲方(印章)：____________ 乙方(印章)：____________

代表签字：____________ 代表签字：____________

签字日期：____________ 年 ________月 ________日

签约地点：____________

发包方：

承包方：

为加强村级组织阵地建设，建设社会主义新农村，甲方决定修建村级组织活动中心。依照《民法典》有关法律及行政法规，本着自愿、平等、诚实信用的原则，经甲乙双方协商，特订立以下条款，双方共同遵守履行。

一、工程名称：村级组织活动中心。

二、工程地点：公路边。

三、工作范围：

1、旧房拆除，由乙方自己承担拆除费用及安全责任，甲方概不负任何责任，拆除的旧房材料归乙方所有。

2、附属工程补充：房前平场回填及水泥硬化，排水沟并盖板和房后排水沟施工。

3、房屋室内电路为走外线。

4、在工程设计图纸中的有关部分变更“一楼两间门面为卷闸门，楼梯间上大会议室为防盗门。二楼两间小会议室为包门，其它为木门，一楼为水泥地面，二楼贴600215;600浅色陶瓷地板砖，楼梯间扶手为不锈钢铝合金材料，基础图纸设计68c，经甲乙双方协商为100c，如基础超深由甲方负责。

四、施工要求：乙方必须按照甲方提供的工程设计图纸说明及其他规定变更要求进行施工，在施工过程中，乙方若不按甲方规定要求施工，造____县检查验收不合格，工程返工，由乙方承担整改费用，甲方概不负任何责任。

五、承包方式：该工程实行双包，由乙方包工、包料，工程按 实际建筑单价为元2，共计建筑 2。

六、工程工期：该工程施工期为 天，即从________年____月____日动工至________年____月____日止竣工(阳历时间)。若工程未按时完成由乙方承担违约责任。

七、付款方式：

1、乙方完成基础地梁大方脚后付乙方1万元。

2、盖好一楼预制板后付乙方1.5万元。

3、主体工程完成后付乙方2万元。

4、该工程全部竣工，经县组织部验收合格后并县组织部下拨工程款到位后付给乙方，剩余部分的工程款由甲方付清。

5、乙方不承担承包工程税费款。

八、安全责任：在施工过程中发生安全事故由乙方承担一切责任，甲方不承担任何责任。

九、本合同未尽事宜，经甲乙双方共同协商解决。

十、本合同从签字之日起生效，若有一方违约，由违约方承担一切法律责任。

十一、本合同一式四份，甲乙双方各执一份，县组织部一份，荔溪乡政府一份。

甲方签字(盖章)： 乙方签字(盖章)： 法人代表：________年____月____日 附：该工程设计图纸7张为本合同组成部分

甲方：_________乙方：_________

身份证号：_________

住址：_________

工作单位：_________

联系电话：_________

经甲乙双方协商达成以下协议：

一、甲方的权利义务：

（1）_________受_________全权委托，作为_________在中国大陆权益的全权代理人。

（2）甲方负责活动期间的日常工作。

（3）本次拍摄活动将特邀人体摄影专家现场进行指导创作。

二、乙方的权利义务：

（1）乙方须遵守拍摄创作活动的时间安排：_________；拍摄地点：_________；时间为（每天早上_________，下午_________）。

（2）乙方在拍摄时对模特不得提出有损国家和个人尊严的不合理要求，不得要求模特作出不健康的形体姿态；不得对模特做有侮辱性的动作，注意文明用语。如有违背，甲方有权拒绝其继续参加拍摄活动。乙方在拍摄过程中不得让模特到有危险的地方或要求模特作出有危及人身安全的动作，模特亦有权拒绝其不合理要求。

（3）乙方对其作品享有发表权（必须为国家正规出版刊物。内部刊物、内部资料不享有此权利）。

（4）个人出版画册（或多人结集出版画册）、挂历、台历、单幅画张等有价出版物，每单幅作品需向甲方交纳_________元模特肖像使用费；如个人组织展览或参加商业展览，每幅须向甲方交纳人民币_________元模特肖像使用费用（参加全国、省、市摄影比赛、沙龙不受此款限制），乙方作品如用于商业性广告每单幅作品须向甲方付_________元人民币。乙方在出版展出使用前，应向_________办理相关手续，否则视为侵权。

（5）乙方不得将本次活动所拍摄作品或现场图片用任何形式上网发布，如需发布需同_________另行签定合同。不得用于其他非法途径，禁止摄像，否则_________将依法追究法律责任。

（6）凡参加拍摄活动的摄影家需向_________交纳至少两幅摄影作品，_________有结集出版的权利，作品刊出后付给作者相应稿酬。

（7）如有纠纷，双方按相关法律程序办理。

甲方（盖章）：___________乙方（签字）：_________

代表人（签字）：_________

_________年____月____日_________年____月____日

签订地点：______________签订地点：______________

实验六 纸层析法观察转氨基作用

【实验名称】：纸层析法观察转氨基作用

09救援一班  第三大组  李岚宇  20xx222336

室温：28°

（一）实验目的：

1、学习氨基酸纸层析的基本原理。

2、掌握氨基酸纸层析的操作原理。

（二）实验原理：

转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应，在转氨酶的催化下，氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用。转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中，是体内氨基酸代谢的重要途径。氨基酸反应时均由专一的转氨酶催化，此酶催化氨基酸的α－氨基转移到另一α－酮基酸上。各种转氨酶的活性不同，其中肝脏的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化如下反应：

α—酮戊二酸 + 丙氨酸谷氨酸 +  丙酮酸

本实验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，加肝匀浆保温后，用纸层析法检查谷氨酸的出现，以证明转氨基作用。纸层析属于分配层析。以滤纸为支持物，滤纸纤维与水亲合力强，水被吸附在滤纸的纤维素的纤维之间形成固定相。有机溶剂与水不相溶，把预分离物质加到滤纸的一端，使流动溶剂经此向另一端移动，这样物质随着流动相的移动进行连续、动态的不断分配。由于物质分配系数的差异，而使移动速度就不一样，在固定相中，分配趋势较大的组分，随流动相移动的速度就慢，反之，在流动相分配趋势较大的成分，移动速度快，最终不同的组分彼此分离，物质在纸上移动的速率可以用比值Rf表示： ALT

物质在一定的溶液中的分配系数是一定的，故比值Rf也相对稳定，因此在同一层析体系中可用Rf值来鉴定被分离的物质。

（三）实验材料与仪器：

试剂：

1、0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液。

2、0.2mol/L Na2HPO4溶液81ml与0.2mol/L NaH2PO4溶液19ml混匀,用蒸馏水稀释20倍。

3、0.1mol/L丙氨酸溶液称取丙氨酸0.891克,先溶于少量0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液中,以1.0 N NaOH仔  细调至pH7.4后, 加磷酸盐缓冲液至100ml。

4 、0.1mol/Lα－酮戊二酸称取α－酮戊二酸1.461克,先溶于少量0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液中，以1.0 N NaOH仔细调至pH 7.4 后，加磷酸盐缓冲液至100ml。

5、0.1mol/L 谷氨酸溶液称取谷氨酸0.735克,先溶于少量0.01mol/LpH 7.4磷酸盐缓冲液中，以1.0 N NaOH仔细调至pH 7.4 后, 加磷酸盐缓冲液至50 ml。

6、0.5%茚三酮溶液称取茚三酮0.5克于100 ml丙酮中溶解。

7、层析溶剂：将重蒸过的酚2份和水1份按比例混合后，放入分液漏斗中，震荡，静置24小时后分层，将下部酚层转移到瓶中备用。

仪器：玻璃匀浆器、10ml试管、培养皿、表面皿、沸水浴锅、37℃恒温水浴箱、9cm圆滤纸、烘箱、手术剪刀、分液漏斗。

（四）实验步骤:

1、肝匀浆制备：取新鲜动物肝0.5克,剪碎后放入匀浆器,加入冷0.01mol/LpH 7.4磷酸盐缓冲液1.0 ml,迅速研成匀浆， 用上述缓冲液4.5ml混匀备用。

2、 酶促反应过程

（1）取离心管两支，编号：1（测定管）、2（对照管），各加肝匀浆0. 5ml。把对照管放沸水浴中加热10分钟，取出冷却。

（2）各加0.1mol/L丙氨酸0.5 ml, 0.1mol/Lα-酮戊二酸0.5 ml,0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液1.5 ml,摇匀。

（3）37℃保温，30分钟后取出，保温完毕。

（4）把测定管放沸水浴中煮10分钟，取出后冷却，过滤。

3、层析

（1）取圆形滤纸一张（直径9cm）放洁白纸上，以圆点为中心，约1 cm为半径,用铅笔划一圆线作为基线,在线上四等份处标清四点编号作为点样原点。

（2）点样：用四根毛细玻璃管分别进行点样。把丙氨酸液、谷氨酸液分别点在原点2、4处。把测定液、对照液分别点在原点1、3处。注意斑点不宜过大（应在直径0.5cm以下）。在第一次点样点干后，再在原处同样点第2次。

（3）层析：先在滤纸圆心处打一小孔（铅笔芯粗细），再取滤纸一条卷成捻如灯芯状,上端插入滤纸中心孔中，下端剪成须状。

（4）把滤纸平放在上述培养皿上，使纸芯下浸入层析液中，盖上培养皿盖。可见层析液沿纸芯上升到滤纸中心，渐向四周扩散。当层析液前缘到离滤纸边缘约1cm时，约25分钟，取出滤纸，用镊子小心取下纸芯，放入烘箱中烘干。

（5）显色：将上述滤纸平放在培养皿上，滴0.5％茚三酮的丙酮溶液，使滤纸全部湿润，再放入烘箱干燥，此时可见紫色斑出现，比较色斑的位置，及色泽深浅，计算Rf值，分析是否发生了转氨基反应。

（五）实验结果记录：

（六）实验讨论：

1、从表格（1）中可以看出，测定管上清液点样出现了两个色斑，根据Rf值的计算也可以看出，测定管中氨基酸发生了转氨基作用，生成的未知物质b为谷氨酸，则未知溶质a为丙氨酸；对照管中因为酶的失活而没有发生转氨基反应，只有丙氨酸，所以色斑只有一个。

2、层析点样时手要洗净，操作中尽可能少量接触滤纸，以免污染。

3、层析液中含有腐蚀性酚，取用时注意安全，防止溅到皮肤及眼睛。

4、点样点不宜过大，直径小于0.5cm.

20xx年9月19日